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          干貨分享:LB培養基怎么配制?

          更新時間:2020-09-09   點擊次數:23369次

          LB培養基,是微生物學實驗中常用的培養基,用于培養大腸桿菌等細菌,其分為液態或是加入瓊脂制成的固態培養基。加入抗生素的 LB 培養基可用于篩選以大腸桿菌為宿主的克隆。

          盡管該培養基的名稱被廣泛解釋為Luria-Bertani 培養基,然而根據其發明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的說法,這個名字來源于英語的 lysogeny broth,即溶菌肉湯

          LB培養基的配制:

          1.成分

          胰蛋白胨(tryptone)10g

          酵母提取物(yeast extract)5g

          氯化鈉(NaCl)10g

          固體培養基另加 瓊脂粉 15-20g

          加雙蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH(約0.2ml)調pH至7.2,121℃滅菌30min


          2.配制方法

          ①稱量 分別稱取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl,置于燒杯中。

          ②溶化 加入所需水量2/3的蒸餾水于燒杯中,用玻棒攪拌,使藥品全部溶化。

          ③調pH 用1mol/L NaOH溶液調pH至7.2。

          ④定容 將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。

          ⑤加瓊脂 加入所需量瓊脂,加熱融化,補足失水。

          ⑥分裝、加塞、包扎。

          ⑦高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。

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